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Forum - Les milieux de culture - Milieu de culture Macropodanthus alatus et Népenthes en tout genre


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le 22/02/2017 15:09
par Pygargue

Salut a tous !!
je me lance dans la culture in vitro car nous venons d'avoir une causse qui vient d'arriver a maturité  : un Macropodanthus alatus, 
Auriez vous des milieux de culture a me proposer pour que ça fonctionne ?
De même j'aimerais me lancer dans les Népenthes en graine ou méristèmes, des conseils en milieux de culture ? 


Merci a tous  et bonne journée !!! 
Pygargue
 
  

Réponse n° 1
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le 22/02/2017 16:03
par Franck31620
Administrateur

Salut Pygargue,
Pour Macropodanthus alatus, il te faut un équivalent de P6668/2 qui s'appelle aussi Orchimax, qui n'est en réalité qu'un MS/4!
Pour les Nepenthes, le milieu de culture passe partout est un MS/3 à PH=5.6.
Pour la culture à partir de graines, attention à la stérilisation...et à l'origine des graines.
Pour la culture de méristèmes, as tu une loupe binoculaire...et de l'expérience?
Bon courage!
  
Réponse n° 2
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le 22/02/2017 17:35
par Pygargue

Tout d'abord merci pour cette réponse si rapide et efficace !!!
alors il y a néanmoins des points a éclaircir sinon c'est trop facile  nquand tu dis que c'est un MS/4, c'est a dire que j'ai juste a acheter du MS et le diluer au quart et compenser avec mon agar pour retrouver les proportions ? (objectif milieu semi liquide 6g/l ?)
Pour la stérilisation des graines d'orchidées je pensais faire 6 min au vortex avec 2 g/l d'hypochlorite de sodium (eau de javel), qu'en penses tu ? car dans le protocole que j'ai c'est de l'hypochlorite de calcium et non sodium ....
pour les Graines de Népenthes l'origine est toujours un problème mais je vais essayer d'en obtenir de bonnes en cette saison. Par contre as tu observé une différence de milieu entre les lowland et highland ? (même si les différence doivent même être intra spécifiques aux espèce ...)
Pour les protocormes, j'avoue que c'est encore un projet, mais j'aimerais vraiment réussir, pour le matériel c'est pas un soucis j'ai accès a des labos, par contre comment différencies tu les méristèmes des cellules différenciées ?  

encore un grand merci pour toute l'aide !!!!
  
Réponse n° 3
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le 22/02/2017 19:00
par Franck31620
Administrateur

'tu dis que c'est un MS/4, c'est a dire que j'ai juste a acheter du MS et le diluer au quart'
oui
'et compenser avec mon agar pour retrouver les proportions ?'
Je ne comprends pas?
'milieu semi liquide 6g/l'
à 6g/L tu as un milieu trop solide, la bonne quantité ses situe entre 4,8 et 5,2.
Pour la stérilisation des graines, je n'utilise plus d'eau de javel pour éviter de rinser.
Pour les Neps, MS3 est passe partout.
Pour les méristèmes, quand tu dissèque et que tu tombe dessus, tu comprends...
  
Réponse n° 4
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le 22/02/2017 19:08
par Pygargue

pour la compensation avec de l'agar, c'était une erreur pardon.
Bon je vais investir dans l'hypochlorite de calcium alors e ton liquide vaisselle en agent mouillant est une bonne idée !
ok merci beaucoup pour toutes les petites infos !!!
si j'arrive a tout avoir pour la semaine prochaine on passe a l'action !!
tu aurais des petites adresse pour trouver des milieux a prix raisonnable ?

encore un grand merci pour toutes ces réponses kkkkkk
  
Réponse n° 5
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le 22/02/2017 19:31
par Franck31620
Administrateur

Une seule goutte de liquide vaisselle.
Pour les milieux de culture, je les fabrique moi-même ;)
Pour l'hypochlorite de calcium, en magasin pour piscine (par 5Kg....attention de prendre un produit 100% hypochlorite et pas d'autres choses dedans). Si tu ne trouve pas, je peux te dépanner.
  
Réponse n° 6
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le 23/02/2017 09:15
par Pygargue

ok ! 
Du coup tu achètes ou les constituants de tes milieux ? fais tu des milieux empiriques pour les orchidées (avec banane, coco etc ....) ? 

Bonne journée 
  
Réponse n° 7
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le 23/02/2017 09:37
par Franck31620
Administrateur

J'ai récupéré il y a pas mal d'années un stock de produits chimiques dans un labo qui pliait boutique.
Depuis que je fais de l'in vitro, j'ai du mettre au point une trentaine de milieux de culture avec effectivement des compléments organiques comme la banane, la pomme de terre, le jus d'ananas, l'eau de coco....pour les orchidées, les plantes carnivores, les adeniums, les cactus...

  
Réponse n° 8
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le 14/03/2017 11:01
par Pygargue

Me revoilà,
Le matériel arrive demain, cependant une dernière question de taille se pose, as tu un temps de stérilisation des graines de Nèpenthes ? (En lien avec la concentration de l'hypochlorite j'imagine) ?

Je vais essayer de faire des photos si ca t'intéresse ...

Bonne journée !
  
Réponse n° 9
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le 14/03/2017 18:24
par Franck31620
Administrateur

Salut,
Hypochlorite de calcium à 5%.
Je te conseille de faire plusieurs lots avec tes graines et fais varier la durée de stérilisation (1 à 3 mn?).
Tu ne t'attaques pas au plus simple!
  
Réponse n° 10
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le 15/03/2017 09:34
par Pygargue

oui le problème c'est que je me retrouve qu'avec deux contenants pour les Nep... du coup je ne peux pas faire des masses d'essais .....et dans la biblio je trouve des choses très différentes - je trouve 10-15 min a 5% dans un doc de Jacques Boulay, - 0.5% pendant 30 s par B Corker (pour du chlorure mercurique)- et un autre article de Boulay qui dit que les graines sont carrément infectées de l'intérieur donc c'est compliquer a réaliser qui qu'il arrive ....- et toi qui me dis 5% 1 à 3 min
Du coup je suis un peu perdu .....
Au Sénat ils stérélisent leurs graines de Paphio 6 min a 5 % (hypochlorite de calcium), je pensais faire de même pour mes graines d'orchidées.... du coup je me disais que proportionnellement a la taille des graines de Nepenthes il faudrait plus....
tu n'en as jamais fait toi ? (j'ai vue tes jamban ... CANON !!!! Mais on en reparlera e)
Penses tu que se soit possible de voir l'avancée du produit par microscope (bino) pour éviter qu'il arrive jusqu'au noyau ?
  
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