Les milieux utilisés en culture in vitro doivent fournir tous les éléments chimiques nécessaires au bon développement des plantes.

Chaque famille, voire chaque espèce, ayant des exigences spécifiques, il est indispensable d'avoir une connaissance précise du substrat, des conditions climatiques ainsi que du cycle de vie de ces dernières.

Ces connaissances doublées de l'expérience permettront d'adapter les différentes concentrations de produits utilisés lors de l'élaboration des milieux de culture ci-dessous.

Plusieurs bases de milieux de culture ont été développées aux cours du siècle dernier :

• Les milieux de KNUDSON pour certaines orchidées exotiques (Dendrobiums) et quelques plantes carnivores (Dionées, Nepenthes)
• Les milieux de MURASHIGE et SKOOG, le plus universel, utilisé à diverses concentrations pour les plantes carnivores ainsi que les orchidées (exotiques ou terrestres).
• Les milieux de MALMGREN, spécifique aux orchidées méditerranéennes, mais aussi pour les Paphiopedilum.

Beaucoup d'autres milieux existent, développés pour des espèces particulières (endives, pomme de terre, bananier...)

En ce qui me concerne, je n'utilise que les trois milieux ci-dessus comme base pour la totalité de mes cultures.

A ces milieux de base, on ajoute souvent des additifs minéraux ou organiques :

• Des hormones végétales
• Des vitamines
• Du fer
• Des éléments organiques
• Du sucre et du charbon